Реакция БТНА с фосфатом
Добавлено: 27 янв 2023, 00:44
На днях я приготовил раствор н-бензоил л-тирозин п-нитроанилида (BTNA) в диметилсульфоксиде с целью проведения анализов активности химотрипсина. Однако, при смешивании этого раствора с фосфатным буффером, смесь обрела жёлтый цвет. Вот что я сделал:
1. Приготовил раствор BTNA в ДМСО. Концентрация BTNA- 1.4mM
2. Приготовил фосфатный буффер с концентрацией 5mM. Сначала я расстворил 0.44г K2HPO4 в 500mL дистиллированной воды, потом добавил соляную кислоту чтобы довести pH до 7.59
3. В кювету я добавил 0.4mL раствора БТНА, потом добавил 0.1mL фосфатного буффера.
Как только были смешаны фосфатный буффер и БТНА, раствор обрёл жёлтый цвет. Это произошло практически мгновенно. В качестве контрольного опыта, я добавил обычную дистиллированную воду в раствор БТНА. Ничего не произошло. Мой вопрос таков: Что за реакция между БТНА и фосфатом?
В другом эксперименте я смешал раствор HEPES той-же концентрации и pH с раствором БТНА. Ничего не произошло.
Структура БТНА:
1. Приготовил раствор BTNA в ДМСО. Концентрация BTNA- 1.4mM
2. Приготовил фосфатный буффер с концентрацией 5mM. Сначала я расстворил 0.44г K2HPO4 в 500mL дистиллированной воды, потом добавил соляную кислоту чтобы довести pH до 7.59
3. В кювету я добавил 0.4mL раствора БТНА, потом добавил 0.1mL фосфатного буффера.
Как только были смешаны фосфатный буффер и БТНА, раствор обрёл жёлтый цвет. Это произошло практически мгновенно. В качестве контрольного опыта, я добавил обычную дистиллированную воду в раствор БТНА. Ничего не произошло. Мой вопрос таков: Что за реакция между БТНА и фосфатом?
В другом эксперименте я смешал раствор HEPES той-же концентрации и pH с раствором БТНА. Ничего не произошло.
Структура БТНА: